오늘 랩미팅인줄 알고 9시 출근했는데 저밖에 없었네요.역시 머리가 안 좋으면 몸이 힘들어요.그리고 저는 이번 주에 제주도에 가기 때문에 이번 주에 실험실에서 할 일이 없네요. 그래서 다음 실험에서 할 RNA extraction에 대해 공부하겠습니다.3.RNAextraction(1)。 목적 RNA를 추출하려면 RNA 서열 자체를 분석하는 데 이용합니다.하지만 대부분 gene expression을 확인하기 위해 사용합니다.DNA는 RNA에 전사, 번역되어 단백질로 발현됩니다.따라서 geneexpression을 보려면 RNA의 양을 측정하면 되는군요!geneexpression을 알기 위해 RNA extraction을 한 후 RNA를 reversetranscription을 통해 cDNA로 바꾸고 PCR을 돌립니다.RNA 자체로는 그 양이 적어 측정하기 어렵기 때문입니다(2). 종류 RNA extraction 방법에는 대표적으로 TRIzol과 Qiagen column kit 두 가지가 있습니다. 먼저 TRIzol은 precipitation(침전) 방법을 이용하여 세포에서 RNA를 빼는데 이용합니다. 다음으로 Qiagen column kit은 column을 이용하는 것으로 조직에서 RNA를 추출할 때 이용합니다.Qiagen은 회사 상호로 이 방법이 더 비싸다고 합니다. https://www.qiagen.com/us/HomeInFocus – 최신 업데이트 및 스토리 발견 | 코로나 콘텐츠를 찾고 있어요? 진단 테스트, 조사 솔루션 및 최신 뉴스에 관한 모든 리소스를 한 곳에서 검색할 수 있습니다. 코로나19 거점 My Science Liana는 세계 어디에 있습니까? 왓슨 페로 리아나는 미생물을 사용하고 있다…www.qiagen.com(3). Qiagen column kit조직에서 RNA을 extraction하는 데 사용됩니다.RNA가 포함된 solution을 column에 넣으면 column의 membrane을 통과하고 RNA만이 membrane에 여과됩니다.이를 washing하고 elution buffer에서 RNA을 추출합니다(4).TRIzol precipitation(침전)세포에서 RNA을 뽑을 때에 사용합니다.Qiagen column방법보다 싸기 때문에 더 많이 이용되고 있습니다.용액에 chloroform을 넣으면 세퍼릿에 분리됩니다.가장 위층이 RNA부분 안의 층이 DNA아래의 층이 단백질 부분입니다.그러므로 가장 윗부분만 분리하고 이를 원심 분리하고 맨 밑의 층만을 얻습니다.주의해야 할 점은 RNA이 불안하다는 것입니다.그 이유는 1.1개의 다발로 구성됐으며 2.RNase가 많아 3.DNA와는 다른 구조에 의해서(OH기가 2개)가수 분해가 용이하기 때문입니다.그러므로 이를 막기 위해서 DEPC treated water를 사용할 필요가 있습니다.외에도 어느 조직에서 RNA을 추출하거나 어느 세포에서 추출하거나 어떤 용도로 사용할지에 의해서 다양한 RNA extraction방법이 있습니다.오늘 점심이날은 신전을 시켜먹었어요 조교말고는 다 매운거 못먹는데…서로를 배려하기위해 중간맛을 주문했어요…무엇을 먹을까 고민하는 재미로 실험실에 옵니다 #RNAextraction #RNA추출 #RNA #실험실 #수의대
